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小鼠卵泡抑素样蛋白3(FSTL3)ELISA试剂盒

字号+作者:佚名 来源:捐卵知识 2019年06月12日

本试验采用改良过碘酸钠法将辣根过氧化物酶标记在抗体上[1],标记完后取上清用SephedexG200凝胶层析进行纯化,洗脱液为0.2mol/LpH7.4的PBS,流速为15ml/h,分步收集,每支3ml,以紫外分光光...

  本试验采用改良过碘酸钠法将辣根过氧化物酶标记在抗体上[1],标记完后取上清用Sephedex G200 凝胶层析进行纯化,洗脱液为0.2mol/L pH7.4的PBS,流速为15ml/h,分步收集,每支3ml,以紫外分光光度计测A280吸光度值,以洗脱体积为横坐标,吸光值为纵坐标做图,收集第一峰即为酶标抗体峰。小鼠卵泡抑素样蛋白3(FSTL3)ELISA试剂盒

  标记完后用紫外分光光度计在分别在280nm、及403nm处测定酶标记物的A值,计算免疫球蛋白量、摩尔比值、酶结合率以及标记率。

  1.2 包被用缓冲液及最适包被抗原浓度的优化

  1.2.1 包被缓冲液的优化

  

  小鼠卵泡抑介绍捐卵犯法吗素样蛋白3(FSTL3)ELISA试剂盒包被抗原时,为了得到最佳的包被效果,我们采用了碳酸盐缓冲液(50mM ph9.6 )、磷酸盐缓冲液(50mM ph7.6)、以及TRIS盐酸缓冲液(50 mM ph7.6)三种缓冲液作为包被液,抗原包被浓度为5ug/ml,及2.5ug/ml,酶标抗体工作浓度为1:400及1:300,用自动酶标仪分析,选择最佳的包被缓冲液系统。同时为了保证缓冲液能够长期保存,我们在包被液中添加了0.01%的硫柳汞作为防腐剂。

  临床考核血清盘的制备要求 1、 采用人的原血清; 2、 血清盘应具有相应的稳定性; 3、 血清盘中样本不含防腐剂,或只含极微量的、不影响检验结果的防腐剂; 4、 血清盘所包含的阴性样本和阳性样本约各占一半; 5、 阳性样本中,应有一定数量的强阳性和弱阳性样本; 6、 血清盘中应有一定数量的临界值上、下含量的样品,以检验试剂的灵敏度。 7、 血清盘中应包含与该项检验相关的病种样本和已积知具有干扰物质(RF因子)的样本,   以检验试剂的特异性。小鼠卵泡抑素样蛋白3(FSTL3)ELISA试剂盒

  正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下:      均值、标准差和概率的关系如下:   X±1SD,概率0.68    X±2SD,概率0.95    X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。小鼠卵泡抑素样蛋白3(FSTL3)ELISA试剂盒

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